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龙图腾网获悉深圳华大生命科学研究院;中国科学院广州生物医药与健康研究院申请的专利多巴胺能神经元前体细胞的标志物及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119269789B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-24发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310823687.8，技术领域涉及：G01N33/569；该发明授权多巴胺能神经元前体细胞的标志物及其应用是由米格尔·埃斯特班;王东业;佐静;安艳茹;商周春设计研发完成，并于2023-07-06向国家知识产权局提交的专利申请。

本多巴胺能神经元前体细胞的标志物及其应用在说明书摘要公布了：本发明涉及医学生物技术领域，本发明提供了多巴胺能神经元前体细胞表面标志物F3和或SSTR2，利用该标志物对多巴胺能神经元前体细胞进行筛选能够获得高纯度多巴胺能神经元前体细胞，所述多巴胺能神经元前体细胞具有较高的向多巴胺能神经元分化的效率。

本发明授权多巴胺能神经元前体细胞的标志物及其应用在权利要求书中公布了：1.分离和或富集多巴胺能神经元前体细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤： 1：将人多能干细胞在6孔板中用mTeSR培养基置于5％CO2，37℃培养箱中培养，每天换液，每3~4天用0.5mMEDTA或Accutase消化，按1:3~1:5的比例传代； 2：当细胞密度达到70％~80％时，用Accutase将细胞消化为单细胞，用含10μMY-27632的mTeSR培养基重悬细胞，按照300,000cellscm2的密度将细胞种于24孔板中，于5％CO2的37℃培养箱中培养； 3开始分化，记为第0天：吸走上清，24孔板每孔加入2mLSRM培养基，并补充100nMLDN193189和10μMSB431542，于5％CO2的37℃培养箱培养； 4第1~2天：弃上清，24孔板每孔加入2mLSRM培养基，并补充100nMLDN193189、10μMSB431542、100ngmLSHHC25II、100ngmLFGF8a和2μM嘌吗啡胺，于5％CO2的37℃培养箱培养； 5第3~4天：弃上清，24孔板每孔加入2mLSRM培养基，并补充100nMLDN193189、10μMSB431542、100ngmLSHHC25II、100ngmLFGF8a、2μM嘌吗啡胺和3μMCHIR99021，于5％CO2的37℃培养箱培养； 6第5~6天：弃上清，按照75％SRM25％N2B27培养基的比例，缓慢添加2mL培养基，并补充100nMLDN193189、100ngmLSHHC25II、100ngmLFGF8a、2μM嘌吗啡胺和3μMCHIR99021，于5％CO2的37℃培养箱培养； 7第7~8天：弃上清，按照50％SRM50％N2B27的比例，在每孔中缓慢添加2mL培养基，并补充100nMLDN193189和3μMCHIR99021，于5％CO2的37℃培养箱培养； 8第9~10天：弃上清，按照25％SRM75％N2B27的比例，在每孔中缓慢添加2mL培养基，并补充100nMLDN193189和3μMCHIR99021，于5％CO2的37℃培养箱培养； 9第11~12天：弃上清，在每孔中缓慢添加2mLN2B27培养基，并补充3μMCHIR99021、20ngmLBDNF、200μM维生素C、20ngmLGDNF、500μM二丁酰环腺苷酸、1ngmLTGF-β3和10μMDAPT，于5％CO2的37℃培养箱培养； 10第13天：传代当天，吸走上清液，每孔加0.5mLAccutase，在37℃消化15~20min，每孔加1.5mLDMEMF-12终止消化；将消化好的细胞重悬后300g离心3min，用2mLN2B27培养基，并补充3μMCHIR99021、20ngmLBDNF、200μM维生素C、20ngmLGDNF、500μM二丁酰环腺苷酸、1ngmLTGF-β3、10μMDAPT和10μMY-27632重悬细胞；按照1：1的比例，将细胞种于用poly-L-orthinine和Laminin预处理的12孔板中，于5％CO2的37℃培养箱培养； 11第14～21天：每天换液，每孔换为新鲜的2mLN2B27培养基，并补充20ngmLBDNF、200μM维生素C、20ngmLGDNF、500μM二丁酰环腺苷酸、1ngmLTGF-β3和10μMDAPT，于5％CO2的37℃培养箱培养； 12第22天：每孔中加入0.5mLAccutase，37℃消化10~15min，加入0.3mL3％BSA质量百分数终止消化，轻柔吹打重悬细胞，将细胞悬液300g离心5min，吸走上清液，再用0.5mL3％BSA质量百分数重悬细胞，室温封闭15min；然后利用F3-PE抗体进行分离和富集，获得所述多巴胺能神经元前体细胞。

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