杭州师范大学马孝霞获国家专利权
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龙图腾网获悉杭州师范大学申请的专利一种温郁金胚性愈伤组织快速增殖和遗传转化再生的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118402468B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202410589545.4,技术领域涉及:C12N15/82;该发明授权一种温郁金胚性愈伤组织快速增殖和遗传转化再生的方法是由马孝霞;谢恬;马佳伟;尹秀;王倩;徐梦蝶;殷晓浦;卫秋慧设计研发完成,并于2024-05-13向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种温郁金胚性愈伤组织快速增殖和遗传转化再生的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种温郁金胚性愈伤组织快速增殖和遗传转化再生的方法,属于植物组织培养技术领域。所述方法包括:首先将温郁金胚性愈伤组织接种到液体培养基中进行悬浮培养得到温郁金胚性愈伤组织细胞团,再加入到农杆菌侵染液中进行侵染,然后共培养后转移至分化培养基中培养得到温郁金转基因再生植株。利用本发明提供的悬浮培养基可实现温郁金胚性愈伤组织的大规模快速增殖,且增殖得到的胚性愈伤组织细胞团生长状态良好;在温郁金遗传转化体系建立过程中,采用共培养后直接分化培养的方式,且分化培养基中不添加抗性筛选,添加抑菌剂特美汀,实现高效分化再生成转基因植株。
本发明授权一种温郁金胚性愈伤组织快速增殖和遗传转化再生的方法在权利要求书中公布了:1.一种温郁金胚性愈伤组织快速增殖和遗传转化再生的方法,其特征在于,包括以下步骤: 1将温郁金胚性愈伤组织接种于液体培养基中悬浮培养得到温郁金胚性愈伤组织细胞团,所述液体培养基为MS培养基中添加有25-35gL的蔗糖、0.2-0.4mgL的6-BA、0.5-1.5mgL的2,4-D;悬浮培养的条件为:23±2℃、100-150rpm条件下暗培养50-70天,期间每两周补充新鲜培养液; 2将温郁金胚性愈伤组织细胞团加入到农杆菌侵染液中进行侵染;所述农杆菌侵染液的制备方法包括:通过化学转化法将重组质粒转化至农杆菌中,培养后收集菌体,使用感菌液重悬,OD600浓度保持在0.4-0.6,加入100-200μmolL的乙酰丁香酮诱导培养0.5-1h;所述感菌液为MS培养基中添加有25-35gL的蔗糖,pH值5.3; 3侵染后的愈伤组织转移至共培养基中进行共培养,所述共培养基为MS培养基中添加有25-35gL的蔗糖、5-10gL的琼脂、100-200μmolL的乙酰丁香酮,pH值为5.3;共培养条件为:25±2℃条件下暗培养2-3天; 4将共培养后的愈伤组织转移至分化培养基中培养得到温郁金转基因再生植株,所述分化培养基为MS培养基中添加有25-35gL的蔗糖、5-10gL的琼脂、1-3mgL的6-BA、1-3mgL的NAA、150-250mgL的特美汀。
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