浙江万里学院李雪获国家专利权
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龙图腾网获悉浙江万里学院申请的专利一种以杜鹃花瓣为外植体的愈伤组织诱导、分化和植株再生的方法及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119522786B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411536885.7,技术领域涉及:A01G18/22;该发明授权一种以杜鹃花瓣为外植体的愈伤组织诱导、分化和植株再生的方法及其应用是由李雪;江华婷;李加;俞超;何若菡设计研发完成,并于2024-10-31向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种以杜鹃花瓣为外植体的愈伤组织诱导、分化和植株再生的方法及其应用在说明书摘要公布了:本发明提供一种以杜鹃花瓣为外植体的愈伤组织诱导、分化和植株再生的方法及其应用,属于组织培养技术领域,具体步骤包括:S1:外植体选取与消毒;S2:愈伤组织诱导;S3:愈伤组织继代;S4:不定芽分化;S5:不定根分化。在上述方法中,本发明具体限定了各步骤的限定条件和培养基组成成分,采用本发明提供的培养基和相关条件控制方法,可以有效降低杜鹃花瓣组织培养的污染率,提高愈伤组织出愈率和分化率,进而提高再生植株的成活率。
本发明授权一种以杜鹃花瓣为外植体的愈伤组织诱导、分化和植株再生的方法及其应用在权利要求书中公布了:1.一种以杜鹃花瓣为外植体的愈伤组织诱导、分化和植株再生的方法,其特征在于,包括以下步骤: S1:外植体选取与消毒 2~4℃处理初开期杜鹃花后,取外层花瓣,使用流水去除灰尘后,依次用70~75%乙醇浸泡花瓣30s,无菌水洗涤2次,6%次氯酸钠浸泡7~8min,无菌水洗涤3次,吸干花瓣表面水分并采用手撕法去除褐化部分和花瓣边缘以引发伤口,引发伤口的方式为刀切法或撕裂法; S2:愈伤组织诱导 将步骤S1处理结束后的花瓣接种于愈伤组织诱导培养基中,25±2℃,400~600Lx,光照16hd下培养25~30d,所述愈伤组织诱导培养基的成分和配比为:WPM培养基,附加终浓度为1.0~1.2gL硝酸钙,30gL蔗糖,7gL琼脂,0.1~0.2mgLNAA,0.1~0.2mgLTDZ; S3:愈伤组织继代 使用愈伤组织继代培养基对愈伤组织进行继代培养,每18~20d继代1次,共继代2次,培养条件为25±2℃,400~600Lx,光照16hd,所述愈伤组织继代培养基的成分和配比为:WPM培养基,附加终浓度为1.0~1.2gL硝酸钙,30gL蔗糖,7gL琼脂,0.1~0.2mgLNAA,0.1~0.2mgLTDZ; S4:不定芽分化 使用不定芽分化培养基对愈伤组织进行培养,25±2℃,2000~2200Lx,光照16hd下培养25~30d,所述不定芽分化培养基的成分和配比为:WPM培养基,附加终浓度为1.0~1.2gL硝酸钙,30gL蔗糖,7gL琼脂,0.2~0.25mgLNAA,1.0~1.2mgLZT; S5:不定根分化 使用不定根分化培养基对愈伤组织进行培养,25±2℃,2000~2200Lx,光照16hd下培养25~30d,所述不定根分化培养基的成分和配比为:WPM培养基,附加终浓度为1.0~1.2gL硝酸钙,30gL蔗糖,7gL琼脂,0.3~0.4gL活性炭,0.25~0.3mgLNAA,2.0~2.2mgLIBA。
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